Отмывание эритроцитов

Благодаря развитию в ветеринарной медицине банков крови, доступность донорского продукта стала в несколько раз выше, что, в свою очередь, позволило экстренным, тяжелобольным пациентам получать оперативную помощь. Несмотря на то, что в гуманной медицине наиболее развита компонентная терапия, в этом плане ветеринарная трансфузиология значимо уступает своему «старшему брату», где более востребованным продуктом остается цельная кровь. Однако может ли как-то неблагоприятно влиять хранение на эритроцитарные продукты?

Многочисленные исследования показали, что при длительном хранении эритроциты становятся более хрупкими, что может приводить к их гемолизу, как в процессе хранения в контейнере (in vitro), так и в процессе переливания (in vivo). Разрушенные эритроциты высвобождают свободное железо, гемоглобин, гаптоглобин. В хранимой крови наблюдается постепенное нарастание уровня лактата, калия и хлора. Морфология клеток также претерпевает изменения.

Процесс отмывания эритроцитов

Отмывание эритроцитов – это процесс, при котором из имеющихся донорских эритроцитов методом последовательных промываний удаляют плазму, разрушенные клетки и продукты распада компонентов крови, возникающие при хранении.

Большинство имеющейся литературы рекомендует трёхкратное отмывание, однако последние статьи по теме демонстрируют эффективность однократного отмывания, в результате которого удаляется большая часть продуктов распада.¹ Многократные же процедуры, напротив, могут негативно влиять на клеточный состав, приводя к разрушению мембраны эритроцитов.

Поскольку отмывание эритроцитов – это процедура, которая может быть сопряжена с определёнными рисками трансфузионных осложнений для реципиента, проводить его стоит только по показаниям, когда польза превосходит потенциальный вред для пациента. Наиболее рутинно отмывание проводят в процессе проведения перекрёстных проб, для максимального удаления плазмы из эритроцитарной массы, для более понятной интерпретации in vitro процесса, что может происходить в кровяном русле реципиента.

Также применение отмытой эритроцитарной массы может быть оправдано в следующих случаях:

• у пациентов с отягощённым трансфузионным анамнезом;

• для максимального удаления плазмы с антителами или аллоантителами у доноров, чья кровь переливается пациентам с имеющимся к ним антигенам (ярким примером служит отмывание эритроцитарной массы кошки группы А, для её дальнейшего переливания реципиенту с группой АB);

• для реципиентов, у которых есть признаки нефро- и гепатотоксичности, портосистемные шунты или иные проблемы, влияющие на скорость инактивации и выведения аммиака из организма (группа риска реципиентов для развития «гипераммониемии»).

Протокол отмывания эритроцитарной массы

В ветеринарной медицине стандартный протокол отмывания эритроцитарной массы включает в себя использование 0.9% раствора хлорида натрия в качестве основного моющего раствора. Если в качестве препарата у вас используется хранимая цельная кровь, плазму следует предварительно удалить.

Используя стерильные расходные материалы, врач набирает физиологический раствор в шприцы, вводит его в контейнер с эритроцитарной массой из расчёта 1:1 или 2:1 (NaCl : эритроциты), после чего вновь запаивает контейнер и центрифугирует его в течение 7 минут при 5000 g.

После центрифугирования надосадочная жидкость удаляется, а эритроцитарная масса будет пригодна для дальнейшего использования максимум в течение суток из-за повышенных рисков контаминации во время обработки.

Риски отмывания свежих эритроцитов

Не стоит отмывать эритроцитарную массу, что была отобрана менее 7 дней назад: искусственно смоделированное в рамках исследования заражение S. aureus специально выведенных биглей демонстрировало весьма неожиданные результаты.

Считалось, что переливание «старых» (42-дневных), но предварительно отмытых эритроцитов окажет более благотворное влияние на выживаемость реципиентов, нежели переливание неотмытых эритроцитов с таким же сроком хранения. Так оказалось и на деле – удалённые продукты распада, включающие в себя свободный гемоглобин, гаптоглобин и железо значительно повышали шансы на выживаемость у таких реципиентов.

Дело в том, что для ряда патогенов свободные продукты железа – это питательный субстрат, который позволяет ему активно размножаться. В контексте же переливания «свежих» (7-дневных) эритроцитов предполагали, что отмывание никак не изменит общую картину. Однако выяснилось, что за счёт большей хрупкости мембраны «свежих» эритроцитов в процессе отмывания происходило их разрушение, что также приводило к высвобождению большого количества железа и его производных, что проспективно ухудшало исход пациента.

Рекомендации по отмыванию эритроцитов

Таким образом, мы рекомендуем придерживаться схемы, где эритроцитарная масса отмывается однократно, а также оценивать все риски, связанные с самой процедурой и последующим переливанием подобной эритроцитарной массы.

Мы не рекомендуем мыть «свежие» эритроциты (исключением остаётся кошачья кровь группы «А» при переливании её реципиенту с группой крови «AB»), однако считаем отмывание «старых» эритроцитарных продуктов оправданным.

Автор статьи: Любовь Степанова – ветеринарный врач-трансфузиолог и руководитель Банка крови лаборатории «ПОИСК» на пр. Народного Ополчения.

Список использованной литературы:

1.       Harvey G Klein - «The red cell storage lesion(s): of dogs and men», Blood Transfusion, 2017

2.       Ashley C Coll, Matthew K Ross, Matthew L Williams, Robert W Wills, Andrew J Mackin, John M Thomason – «Effect of washing units of canine red blood cells on storage lesions», J. Vet Intern Med, 2022